葉綠素a測定儀的使用方法

目前我國內(nèi)陸自然水體的富營養(yǎng)化日益嚴重，導致水體中的藻類物質(zhì)大量繁殖，由于藻類物質(zhì)中含有葉綠素a，含量較為穩(wěn)定，并且易于人工測定，因此可以通過使用水質(zhì)葉綠素a測定儀檢測水中浮游植物葉綠素a的含量，掌握水體的初級生產(chǎn)力情況和富營養(yǎng)化水平。

葉綠素a測定儀的原理

將一定量樣品用濾膜過濾截留藻類，研磨破碎藻類細胞，用丙酮溶液提取葉綠素，離心分離后分別于750nm、664nm、647nm和630nm波長處測定提取液吸光度，根據(jù)公式計算水中葉綠素a的濃度，可以廣泛適用于海洋監(jiān)測、自來水、污水處理廠、水文水利、養(yǎng)殖漁業(yè)、大學和科研研究所，環(huán)保研究機構(gòu)等。

葉綠素a測定儀的使用方法（以分光光度法為例）

1、水樣的采集

一般使用有機玻璃采水器或其他適當?shù)牟蓸悠鞑杉嫦?.5m水樣，湖泊、水庫根據(jù)需要可進行分層采樣或混合采樣，采樣體積為1L或500ml。如果水樣中含沉降性固體（如泥沙等），應將水樣搖勻后倒入2L量筒，避光靜置30min，取水面下5cm水樣，轉(zhuǎn)移至采樣瓶。在每升水樣中加入1ml碳酸鎂懸濁液，以防止酸化引起色素溶解。

2、制備水樣

在過濾裝置上裝好玻璃纖維濾膜。根據(jù)水體的營養(yǎng)狀態(tài)確定取樣體積，具體可以參考過濾水樣體積，用量筒量取一定體積的混勻水樣，進行過濾，最后用少量蒸餾水沖洗濾器壁。

3、研磨

將樣品濾膜放置于研磨裝置中，加入3ml-4ml丙酮溶液，研磨至糊狀。補加3ml-4ml丙酮溶液，繼續(xù)研磨，并重復1-2次，保證充分研磨5min以上。將完全破碎后的細胞提取液轉(zhuǎn)移至玻璃刻度離心管中，用丙酮溶液沖洗研缽及研磨杵，一并轉(zhuǎn)入離心管中，定容至10ml。

4、浸泡提取

將離心管中的研磨提取液充分振蕩混勻后，用鋁箔包好，放置于4℃避光浸泡提取2h以上，不超過24h。在浸泡過程中要顛倒搖勻2-3次。

5、離心

將離心管放入離心機，以相對離心力1000×g（轉(zhuǎn)速 3000 r/min～4000 r/min）離心10min。然后用針式濾器過濾上清液得到葉綠素a的丙酮提取液（試樣）待測。

6、水樣測定

將試樣移至比色皿中，以丙酮溶液為參比溶液，葉綠素a測定儀于波長750nm、664nm、647nm、630nm處測量吸光度。750nm波長處的吸光度應小于0.005，否則需重新用針式濾器過濾后測定。最后水樣中葉綠素a的質(zhì)量濃度可以按照相應公式進行計算得出。